Os oligonucleotídeos terapêuticos emergem como promissores fármacos no tratamento de diversas doenças, especialmente aquelas originadas por mutações genéticas. Estas moléculas, constituídas por curtas sequências de DNA ou RNA sintetizadas, aderem a sequências complementares presentes no mRNA ou em proteínas dentro das células-alvo. Entre os subtipos destacam-se os oligonucleotídeos antisense (ASOs), RNA aptâmeros e oligonucleotídeos de interferência de RNA (RNAi) [1].
A produção dos oligonucleotídeos terapêuticos é conduzida mediante síntese química em fase sólida. Apesar dos avanços na síntese e na purificação pós-síntese, ainda é esperada certa heterogeneidade na distribuição das cadeias. Nesse contexto, o monitoramento desta distribuição assume importância crucial para garantir a qualidade e a consistência do processo [2].
Neste contexto, a cromatografia de exclusão de tamanho (SEC) destaca-se como uma ferramenta ideal para a análise dessas moléculas, visto que a separação ocorre em condições suaves, utilizando tampões aquosos. Tal abordagem proporciona uma separação eficaz, aproveitando as marcantes discrepâncias de peso molecular entre fitas simples, duplex, multiplexos e fragmentos de baixo peso molecular. No presente estudo, a análise de oligonucleotídeos por SEC com detecção em UV foi conduzida utilizando uma coluna ProteoSil 200-C18.
A coluna ProteoSil 200-C18 da GL Sciences representa uma inovação recente, composta por sílica de alta pureza, com partículas de 3 μm e poros de 200 Å (20 nm). Especificamente desenvolvida para proporcionar uma separação eficiente de proteínas, peptídeos e oligonucleotídeos, esta coluna oferece uma abordagem avançada para a análise precisa dessas moléculas terapêuticas.
